肺癌是我國乃至全球發(fā)病率及死亡率最高的癌癥。靶向用藥能夠有效延長肺癌患者生存期，但依賴于對患者體內(nèi)藥物作用靶點基因及耐藥突變的正確檢測。臨床常見基因檢測的方案多集中于穿刺活檢、血液及手術(shù)切除的組織樣本檢查。然而，血液樣本中存在克隆性造血突變干擾、樣本中來源于腫瘤細胞的游離DNA（circulating tumor DNA，ctDNA）分子含量稀少等一系列局限性，導(dǎo)致特異性與敏感性較低；而部分晚期肺癌患者身體狀況較差，不具備手術(shù)條件，無法進行腫瘤組織的基因檢測，因此需要積極尋找全新的臨床檢測樣本類型。

    允英醫(yī)療聯(lián)合上海中山醫(yī)院，募集144名肺部存在病變的患者（其中肺癌患者110人，非肺癌患者33人，排除轉(zhuǎn)移灶1人），對支氣管鏡檢查中產(chǎn)生的肺泡灌洗液樣本是否能夠用于臨床基因檢測進行研究。研究收集入組患者進行診斷性支氣管鏡檢查期間產(chǎn)生的生理鹽水沖洗液，配對血漿樣本、穿刺活檢樣本及手術(shù)組織樣本，基于允英自主研發(fā)的Alldetect?技術(shù)開展EGFR基因突變檢測（圖1）。

圖1 研究方案

    本研究以組織檢測結(jié)果作為金標準，發(fā)現(xiàn)沖洗液檢測敏感性與特異性與沖洗位置有關(guān)：病灶中心的沖洗液樣本檢測表現(xiàn)遠超病灶周邊的樣本檢測表現(xiàn)（敏感性：100% vs 66.7%，p=0.009；一致性：100% vs 86.4%，p=0.007）。同時，腫瘤直徑也是影響沖洗液樣本檢測敏感性的重要因素，直徑≥20 mm的腫瘤檢測敏感度（100% vs 50%，p=0.002）和一致率（100% vs 80%，p=0.002）更高。其他諸如腫瘤位置、腫瘤分期、支氣管鏡檢查方式、沖洗時間等因素均無法導(dǎo)致沖洗液樣本的敏感度提升（圖2）。

    此外，本研究證實相比于組織樣本，支氣管鏡沖洗液在EGFR突變檢測中的敏感性、特異性和一致性分別高達92.5%、100%和97.9%，敏感性顯著高于血液樣本（62.5%）與穿刺活檢樣本（77.5%），甚至成功在6例穿刺活檢呈假陰性結(jié)果的肺癌患者中，準確鑒定出EGFR突變（圖3）。

圖3 沖洗液樣本與其它樣本檢測結(jié)果對比

    綜上，本研究基于允英自研Alldetect?技術(shù)，嘗試了支氣管鏡沖洗液樣本在肺癌患者基因檢測中的臨床應(yīng)用。研究明確了沖洗液樣本對EGFR突變狀態(tài)的檢測結(jié)果與組織樣本高度一致，且特異性與敏感性均高于穿刺活檢與血液樣本，檢測敏感度僅受靶標病灶直徑及其余沖洗液接觸程度的影響，是一種極富潛力新穎臨床樣本。